Plasmide CRISPR/Cas9 KO Nup88 (m): sc-422392
- Espèces cibles: mouse
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Nup88 Le plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) est un ensemble de plasmides, chacun codant pour la nucléase Cas9 et un ARN guide (gRNA) de 20 nt spécifique à la cible, conçu pour une efficacité de knockout maximale à l'aide de séquences issues de la bibliothèque GeCKO v2
- Les séquences d'ARN guide (gRNA) dirigent Cas9 pour induire des cassures double brin (DSB) spécifiques au site dans le locus génomique Nup88, entraînant un knock-out génique par jonction non homologue (NHEJ)
- Les gènes de résistance à la puromycine et RFP sont flanqués de sites LoxP, permettant la suppression des marqueurs de sélection via la recombinase Cre (Cre Vector : sc-418923) après l'établissement de lignées cellulaires knock-out stables
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: Nup88 Antibody (H-7): sc-365868
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide CRISPR/Cas9 KO Nup88 (m) | sc-422392 | 20 µg | $397.00 |
Présentation
Nup88 (nucléoporine 88 kDa) est un composant essentiel du complexe du pore nucléaire, qui contribue au transport nucléocytoplasmique et à l’organisation globale de l’enveloppe nucléaire. En s’associant à d’autres nucléoporines et à des récepteurs de transport, Nup88 aide à réguler le trafic des protéines et des ARN qui contrôlent les programmes transcriptionnels, la progression du cycle cellulaire et la signalisation en réponse au stress. Des altérations de l’abondance ou de la localisation de Nup88 ont été associées à des défauts de fidélité du transport nucléaire et de maintenance du génome, des processus fréquemment perturbés dans des contextes prolifératifs et neurodéveloppementaux. Le Nup88 murin est donc largement utilisé pour étudier la régulation, dépendante des pores nucléaires, de la signalisation et de l’expression génique dans la physiologie normale et dans des états cellulaires pertinents pour les maladies.
Le plasmide CRISPR/Cas9 KO Nup88 (m) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène Nup88 dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du Nup88, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.
La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert Nup88 à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine Nup88.
Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en Nup88 pour l'étude de la signalisation de Nup88, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.
Caractéristiques principales
- sgRNA ciblant le ou les exons de Nup88 essentiels à la fonction de Nup88
Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de Nup88 pour améliorer l'efficacité du knock-out
Compatible avec l'administration par transfection
Variantes de conception
CRISPR +/- HDR
- Les gRNA codés par le Nup88 plasmide CRISPR/Cas9 KO (m) et le Nup88 plasmide CRISPR/Cas9 KO (m2) ciblent des sites distincts au sein du locus Nup88. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Les constructions donneuses HDR codées par le Nup88 plasmide HDR (m) et le Nup88 (m2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie Nup88 pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles Nup88 définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.