Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Nup88 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-404091
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- Nup88 El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico Nup88, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: Nup88 Anticuerpo (H-7): sc-365868
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Nup88 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-404091 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
NUP88 codifica Nup88, un componente central del complejo del poro nuclear que contribuye al transporte nucleocitoplasmático y a la organización de la cara citoplasmática de los poros nucleares. Nup88 participa en la regulación del tráfico de proteínas y ARN, influye en la progresión del ciclo celular e interactúa con vías que controlan la expresión génica mediante la localización dependiente del transporte de reguladores transcripcionales. La desregulación de la expresión de NUP88 o la alteración de la dinámica del transporte nuclear se han asociado con la biología tumoral y señales aberrantes, lo que la hace relevante para estudios sobre proliferación, respuestas al estrés y estabilidad del genoma. En células humanas, la perturbación de Nup88 ofrece un punto de entrada directo para examinar cómo la composición del poro nuclear determina la selectividad del transporte y los programas transcripcionales posteriores.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO Nup88 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen NUP88 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del NUP88 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de NUP88 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína Nup88.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en NUP88 para la investigación de la señalización de Nup88, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de NUP88 críticos para la función de Nup88
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de NUP88 para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido Nup88 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido Nup88 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus NUP88. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR Nup88 (h) y el plásmido HDR Nup88 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología NUP88 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana NUP88 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.