Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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NTR1 Double Nickase Plasmid (h): sc-402552-NIC
- Zielspezies: human
- 20 µg transfektionsfertige, aufgereinigte Plasmid DNA; geeignet für 20 Transfektionen
- Das NTR1 Double Nickase Plasmid (h) wird als Plasmid-Paar geliefert. Die einzelnen Plasmide kodieren für eine D10A mutierte Cas9 Nuklease sowie für je eine unterschiedliche, zielspezifische 20nt guide RNA (gRNA) Sequenz. Dies erlaubt eine hohe Knockout-Effizienz bei gleichzeitig größerer Spezifität als das entsprechende CRISPR/Cas9 KO Plasmid
- gRNA Sequenzpaare liegen ca. 20 bp auseinander um ein spezifisches Cas9-vermitteltes "Double Nicking" der genomischen DNA zu erlauben und so im Resultat den Effekt eines Doppelstrangbruchs nachzuahmen.
- Ein Plasmid kodiert für ein Puromycin-Resistenzgen zur Selektion von stabilen Knockout-Zellen. Das andere Plasmid kodiert für ein GFP-Gen für den visuellen Nachweis der Transfektion
- NTR1 Double-Nickase-Plasmid (h) und NTR1 Double-Nickase-Plasmid (h2) kodieren unterschiedliche gepaarte gRNA-Designs, die auf NTSR1 abzielen. Möglicherweise ist eines oder sind beide Designs verfügbar
- Nach der Transfektion kann die Effizienz des Gen-Knockouts per Western Blot oder histologisch mit folgendem Antikörper überprüft werden: NTR1: sc-376958
Bestellinformation
| Produkt | Katalog # | EINHEIT | Preis | ANZAHL | Favoriten | |
NTR1 Double Nickase Plasmid (h) | sc-402552-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
NTR1 Double Nickase Plasmid (h2) | sc-402552-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
NTSR1 kodiert den Neurotensinrezeptor 1 (NTR1), einen GPCR der Klasse A, der das Neuropeptid Neurotensin bindet und dadurch die intrazelluläre Signalübertragung über eine Gαq/PLCβ‑getriebene Ca²⁺-Mobilisierung und PKC-Aktivierung reguliert; zusätzlich ist eine Kopplung an MAPK/ERK sowie ein β‑Arrestin‑vermitteltes Trafficking beschrieben. NTR1 beeinflusst die Neurotransmission, die Kontraktion glatter Muskulatur und sekretorische Prozesse über Rezeptordesensibilisierung, Internalisierung und Cross-Talk mit anderen GPCR-Signalwegen. Veränderte NTSR1-Expression und -Signalgebung wurden in mehreren krankheitsrelevanten Kontexten mit fehlregulierten proliferativen und inflammatorischen Programmen in Verbindung gebracht, was NTSR1 zu einem geeigneten Knotenpunkt für mechanistische Studien der Dynamik von GPCR-Signalwegen macht. Als Membranrezeptor mit schneller, ligandeninduzierter Endozytose wird NTR1 zudem häufig eingesetzt, um Rezeptorpharmakologie, kompartimentalisierte Signalgebung und nachgeschaltete transkriptionelle Antworten zu untersuchen.
NTR1 Das Double-Nickase-Plasmid (h) besteht aus einem aufeinander abgestimmten Plasmidpaar, das für die hochspezifische Bearbeitung des NTSR1-Lokus in human-Zelllinien entwickelt wurde. Jedes Plasmid exprimiert eine Cas9-D10A-Nickase und eine spezifische sgRNA, die auf entgegengesetzte DNA-Stränge innerhalb von NTSR1 abzielt. Wenn sie auf benachbarte Stellen auf entgegengesetzten DNA-Strängen gerichtet sind, erzeugen die beiden Nickasen versetzte Einzelstrang-Schnitte, die zusammen einen versetzten Doppelstrangbruch erzeugen, was eine koordinierte On-Target-Aktivität beider Guides erfordert. Der resultierende DNA-Bruch wird durch endogene zelluläre Reparaturwege behoben, meist durch nicht-homologe Endverknüpfung (NHEJ), was zu Insertionen oder Deletionen führt, die die NTSR1-Funktion stören. Durch die Notwendigkeit einer doppelten sgRNA-Bindung am Zielort erhöht der Doppel-Nick-Ansatz die Spezifität der Bearbeitung und bietet eine komplementäre CRISPR-Strategie für Anwendungen, bei denen eine zusätzliche Kontrolle über die Zielgenauigkeit gewünscht ist.
Um eine effiziente Identifizierung editierter Zellen zu unterstützen, kodiert ein Plasmid GFP zur fluoreszierenden Visualisierung transfizierter Populationen, während das Begleitplasmid ein Puromycin-Resistenzgen für die Antibiotika-Selektion trägt. Zusammen unterstützen diese Merkmale eine effiziente Anreicherung co-transfizierter Populationen und vereinfachen die Validierung von Klonen mit NTSR1-Störung.
Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.