NQO1 Lentiviral Activation Particles (m): sc-421913-LAC

Das Mausgen **Nqo1** kodiert die NAD(P)H:Chinon-Oxidoreduktase 1 (NQO1), ein zytosolisches Flavoprotein, das die obligate Zwei-Elektronen-Reduktion von Chinonen zu Hydrochinonen katalysiert und dadurch Redox-Cycling sowie die Bildung reaktiver Sauerstoffspezies begrenzt. NQO1 ist ein klassisches Ziel des NRF2/KEAP1-Antioxidans-Response-Elements (ARE) und unterstützt die zelluläre Entgiftung, die Aufrechterhaltung der Redox-Homöostase und den Schutz vor elektrophilem Stress. Über seine Funktionen im Xenobiotika-Metabolismus und in der Kontrolle von oxidativem Stress überschneidet sich die NQO1-Aktivität mit Signalwegen, die für Entzündung, Karzinogenese und Modelle von Gewebeschädigung relevant sind. Eine veränderte Regulation von **Nqo1** wird in der biomedizinischen Forschung häufig als Readout für die Aktivierung des NRF2-Signalwegs und für chemische Stressantworten verwendet.

NQO1 Lentivirale Aktivierungspartikel (m) erfüllen diesen Bedarf, indem sie das vollständige Transkriptionsaktivierungssystem des Synergistic Activation Mediator (SAM) in transduktionsbereite, hoch-titrige lentivirale Partikel verpacken und so eine effiziente Nqo1-Hochregulation über ein breiteres Spektrum menschlicher Zelltypen ermöglichen.

NQO1 Lentivirale Aktivierungspartikel (m) liefern alle funktionellen Komponenten des Synergistic Activation Mediator (SAM)-Systems über lentivirale Transduktion. Das System umfasst drei Partikelpräparate, die gemeinsam in Zielzellen transduziert werden: eines, das für katalytisch inaktives dCas9 (Mutationen D10A und N863A) kodiert, das mit der VP64-Transaktivierungsdomäne und einem Blasticidin-Resistenzgen fusioniert ist; eines, das für das MS2-p65-HSF1-Fusionsprotein mit einem Hygromycin-Resistenzgen kodiert; und eines, das für eine zielspezifische 20-nt-sgRNA kodiert, die an zwei MS2-RNA-Aptamere mit einem Puromycin-Resistenzgen fusioniert ist. Nach der lentiviralen Transduktion und der genomischen Integration der Expressionskassetten werden die SAM-Komponenten stabil exprimiert und lagern sich am Zielort innerhalb der proximalen Promotorregion stromaufwärts der Nqo1-Transkriptionsstartstelle an, wo VP64, p65 und HSF1 kooperativ wirken, um endogene Transkriptionsmaschinerie zu rekrutieren und eine anhaltende Hochregulation der endogenen NQO1-Expression zu bewirken. Die Verwendung von nuklease-inaktivem dCas9 verhindert die Einführung von Doppelstrangbrüchen in der DNA und bewahrt den nativen Nqo1-Genomlokus sowie die regulatorische Architektur.

Das lentivirale Format bietet mehrere praktische Vorteile: Die stabile genomische Integration unterstützt eine vererbbare Aktivierung über Zellteilungen hinweg; Partikelpräparate mit hohem Titer machen eine eigene Virusproduktion überflüssig; und die Kompatibilität mit primären, sich nicht teilenden und transfektionsresistenten Zelltypen erweitert die experimentellen Möglichkeiten. Eine erfolgreiche Transduktion kann durch eine dreifache Antibiotika-Selektion mit Puromycin, Hygromycin und Blasticidin bestätigt und verstärkt werden.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.