Plásmido Doble Nickase (h) Nicotinic Acetylcholine Receptor alpha 7/CHRNA7: sc-416614-NIC

CHRNA7 codifica la subunidad α7 del receptor nicotínico de acetilcolina, un canal catiónico homopentamérico activado por ligando que media la señalización colinérgica rápida y la entrada de calcio. La actividad del nAChR α7 influye en vías intracelulares dependientes de Ca²⁺, incluidas MAPK/ERK, PI3K–AKT y la señalización de CaMK, moldeando así la liberación de neurotransmisores, la plasticidad sináptica y la excitabilidad neuronal. En contextos inmunitarios y gliales, CHRNA7 contribuye a la modulación de las respuestas inflamatorias mediante la regulación colinérgica de la producción de citocinas. La expresión o función desregulada de CHRNA7 se ha vinculado con la biología de enfermedades neuropsiquiátricas y neurodegenerativas, y se estudia ampliamente en el contexto de la cognición, el filtrado sensorial (sensory gating) y la disfunción neural asociada a la inflamación.

Nicotinic Acetylcholine Receptor alpha 7/CHRNA7 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus CHRNA7 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de CHRNA7. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de CHRNA7. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.

Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con CHRNA7 alterado.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.