Nicotinic Acetylcholine Receptor alpha 6/CHRNA6 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-418955

Descripción general

Chrna6 codifica la subunidad α6 de los receptores nicotínicos neuronales de acetilcolina (nAChR), canales catiónicos activados por ligando que modulan la excitabilidad de la membrana y la liberación de neurotransmisores en respuesta a la acetilcolina y la nicotina. Los nAChR que contienen α6 están enriquecidos en circuitos dopaminérgicos y otros circuitos catecolaminérgicos, donde regulan la entrada de calcio y moldean la señalización sináptica y la plasticidad. A través de las vías de neurotransmisión colinérgica, CHRNA6 contribuye a la actividad de redes relacionadas con la recompensa y a la neuromodulación impulsada por estímulos. La variación genética y funcional en CHRNA6 se ha vinculado con respuestas alteradas a la nicotina y fenotipos neuroconductuales, lo que respalda su relevancia para la biología de la adicción y los modelos de disfunción de circuitos dopaminérgicos.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO Nicotinic Acetylcholine Receptor alpha 6/CHRNA6 (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Chrna6 en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Chrna6 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Chrna6 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína Nicotinic Acetylcholine Receptor alpha 6/CHRNA6.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Chrna6 para la investigación de la señalización de Nicotinic Acetylcholine Receptor alpha 6/CHRNA6, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de Chrna6 críticos para la función de Nicotinic Acetylcholine Receptor alpha 6/CHRNA6
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Chrna6 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido Nicotinic Acetylcholine Receptor alpha 6/CHRNA6 CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido Nicotinic Acetylcholine Receptor alpha 6/CHRNA6 CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Chrna6. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR Nicotinic Acetylcholine Receptor alpha 6/CHRNA6 (m) y el plásmido HDR Nicotinic Acetylcholine Receptor alpha 6/CHRNA6 (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Chrna6 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Chrna6 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.