Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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NF90 Double Nickase Plasmid (h): sc-402626-NIC
- Zielspezies: human
- 20 µg transfektionsfertige, aufgereinigte Plasmid DNA; geeignet für 20 Transfektionen
- Das NF90 Double Nickase Plasmid (h) wird als Plasmid-Paar geliefert. Die einzelnen Plasmide kodieren für eine D10A mutierte Cas9 Nuklease sowie für je eine unterschiedliche, zielspezifische 20nt guide RNA (gRNA) Sequenz. Dies erlaubt eine hohe Knockout-Effizienz bei gleichzeitig größerer Spezifität als das entsprechende CRISPR/Cas9 KO Plasmid
- gRNA Sequenzpaare liegen ca. 20 bp auseinander um ein spezifisches Cas9-vermitteltes "Double Nicking" der genomischen DNA zu erlauben und so im Resultat den Effekt eines Doppelstrangbruchs nachzuahmen.
- Ein Plasmid kodiert für ein Puromycin-Resistenzgen zur Selektion von stabilen Knockout-Zellen. Das andere Plasmid kodiert für ein GFP-Gen für den visuellen Nachweis der Transfektion
- NF90 Double-Nickase-Plasmid (h) und NF90 Double-Nickase-Plasmid (h2) kodieren unterschiedliche gepaarte gRNA-Designs, die auf ILF3 abzielen. Möglicherweise ist eines oder sind beide Designs verfügbar
- Nach der Transfektion kann die Effizienz des Gen-Knockouts per Western Blot oder histologisch mit folgendem Antikörper überprüft werden: NF90: sc-377406
Bestellinformation
| Produkt | Katalog # | EINHEIT | Preis | ANZAHL | Favoriten | |
NF90 Double Nickase Plasmid (h) | sc-402626-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
NF90 Double Nickase Plasmid (h2) | sc-402626-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
ILF3 codiert für NF90, ein doppelsträngiges RNA-bindendes Protein, das an der posttranskriptionellen Genregulation beteiligt ist, indem es die Stabilität, das Spleißen, den nukleären Export und die Translation von mRNA moduliert – häufig in Zusammenarbeit mit NF45 und weiteren ribonukleoproteinären Partnern. NF90 wirkt an angeborenen antiviralen Antworten und stressadaptiven Programmen mit, indem es interferonbezogene Transkripte und Wege des RNA-Stoffwechsels beeinflusst, und kann zudem die Zellzykluskontrolle durch selektive Regulation wachstumsassoziierter mRNAs mitsteuern. Über seine Interaktionen mit der Transkriptions- sowie der RNA-Prozessierungsmaschinerie trägt NF90 dazu bei, Genexpressionsprogramme zu koordinieren, die mit Proliferation, Differenzierung und zellulärer Stresssignalgebung verknüpft sind. Eine Fehlregulation von ILF3/NF90 wurde mit einer veränderten RNA-Homöostase in Zusammenhängen in Verbindung gebracht, die für Tumorbiologie und inflammatorische Phänotypen relevant sind, was es zu einem nützlichen Knotenpunkt für mechanistische Studien RNA-getriebener Regulation macht.
NF90 Das Double-Nickase-Plasmid (h) besteht aus einem aufeinander abgestimmten Plasmidpaar, das für die hochspezifische Bearbeitung des ILF3-Lokus in human-Zelllinien entwickelt wurde. Jedes Plasmid exprimiert eine Cas9-D10A-Nickase und eine spezifische sgRNA, die auf entgegengesetzte DNA-Stränge innerhalb von ILF3 abzielt. Wenn sie auf benachbarte Stellen auf entgegengesetzten DNA-Strängen gerichtet sind, erzeugen die beiden Nickasen versetzte Einzelstrang-Schnitte, die zusammen einen versetzten Doppelstrangbruch erzeugen, was eine koordinierte On-Target-Aktivität beider Guides erfordert. Der resultierende DNA-Bruch wird durch endogene zelluläre Reparaturwege behoben, meist durch nicht-homologe Endverknüpfung (NHEJ), was zu Insertionen oder Deletionen führt, die die ILF3-Funktion stören. Durch die Notwendigkeit einer doppelten sgRNA-Bindung am Zielort erhöht der Doppel-Nick-Ansatz die Spezifität der Bearbeitung und bietet eine komplementäre CRISPR-Strategie für Anwendungen, bei denen eine zusätzliche Kontrolle über die Zielgenauigkeit gewünscht ist.
Um eine effiziente Identifizierung editierter Zellen zu unterstützen, kodiert ein Plasmid GFP zur fluoreszierenden Visualisierung transfizierter Populationen, während das Begleitplasmid ein Puromycin-Resistenzgen für die Antibiotika-Selektion trägt. Zusammen unterstützen diese Merkmale eine effiziente Anreicherung co-transfizierter Populationen und vereinfachen die Validierung von Klonen mit ILF3-Störung.
Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.