NFκB p50 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-421876
- Especies Diana: mouse
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- NFκB p50 El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico NFκB p50, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: p-NFκB p50 Anticuerpo (A-8): sc-271908
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
NFκB p50 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-421876 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
Nfkb1 codifica NFκB p50, un componente central de unión al ADN de la familia de factores de transcripción NF-κB que se genera mediante el procesamiento del precursor p105. NFκB p50 participa en la señalización canónica de NF-κB aguas abajo de receptores como TNFR, IL-1R y los receptores tipo Toll, para regular la expresión de genes inflamatorios, las respuestas inmunitarias innata y adaptativa, la supervivencia celular y la señalización de estrés. Según la composición del dímero, los complejos que contienen p50 pueden activar la transcripción (p. ej., con RelA/p65) o reprimirla (p. ej., homodímeros de p50), moldeando programas de citocinas y la función de macrófagos y linfocitos. La desregulación de las vías impulsadas por Nfkb1 se utiliza ampliamente como vínculo mecanístico en modelos murinos de inflamación crónica, autoinmunidad, infección y microambientes inflamatorios promotores de tumores.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO NFκB p50 (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Nfkb1 en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Nfkb1 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Nfkb1 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína NFκB p50.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Nfkb1 para la investigación de la señalización de NFκB p50, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de Nfkb1 críticos para la función de NFκB p50
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Nfkb1 para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido NFκB p50 CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido NFκB p50 CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Nfkb1. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR NFκB p50 (m) y el plásmido HDR NFκB p50 (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Nfkb1 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Nfkb1 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.