Plásmido Doble Nickase (m) Myosin XVIIIA: sc-436163-NIC
- Especies Diana: mouse
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (m)Myosin XVIIIa consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa Myosin XVIIIa (m) y el plásmido de doble nickasa Myosin XVIIIa (m2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a Myo18a. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: Myosin XVIIIa Anticuerpo (H-10): sc-365328
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (m) Myosin XVIIIA | sc-436163-NIC | 20 µg | $410.00 |
Myo18a codifica la miosina XVIIIA, una miosina no convencional que conecta la dinámica del citoesqueleto de actina con la organización intracelular y la señalización. En células de ratón, la miosina XVIIIA contribuye a procesos como la adhesión y la migración celular, y al mantenimiento de la arquitectura celular, al coordinar complejos asociados a actina e interacciones de andamiaje. La remodelación desregulada de la actina y la señalización del citoesqueleto son ampliamente relevantes para fenotipos que implican alteraciones en la motilidad, la polaridad y la organización tisular, lo que convierte a Myo18a en un objetivo útil para estudios mecanísticos de estas vías. Dado que la remodelación del citoesqueleto se interrelaciona con rutas que influyen en la proliferación y las respuestas al estrés, la perturbación de Myo18a puede ayudar a dilucidar cómo las estructuras dependientes de actina moldean el comportamiento celular en modelos relevantes para enfermedades.
Myosin XVIIIa El plásmido de doble nicasa (m) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus Myo18a en líneas celulares mouse. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de Myo18a. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de Myo18a. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con Myo18a alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.