Plasmide Double Nickase (m) Mucin 2/MUC2: sc-421751-NIC
- Espèces cibles: mouse
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (m) Mucin 2/MUC2 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide Mucin 2/MUC2 Double Nickase (m) et le plasmide Mucin 2/MUC2 Double Nickase (m2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant Muc2. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
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| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (m) Mucin 2/MUC2 | sc-421751-NIC | 20 µg | $410.00 |
Muc2 code la mucine 2 (MUC2), une mucine sécrétée formant un gel qui constitue, chez la souris, le principal composant structurel de la barrière de mucus intestinal. Grâce à une O‑glycosylation étendue et à sa polymérisation, MUC2 assure la protection de l’épithélium, la séparation spatiale du microbiote et la régulation de l’homéostasie immunitaire de la muqueuse. Son expression et sa maturation sont liées aux programmes de différenciation des cellules caliciformes et aux processus de la voie sécrétoire, notamment aux réponses au stress du réticulum endoplasmique (RE), tandis que l’intégrité de la couche de mucus influence les réseaux de signalisation inflammatoire à la surface épithéliale. Des altérations de la fonction ou de l’expression de Muc2 sont largement utilisées pour modéliser le dysfonctionnement de la barrière et l’inflammation muqueuse, avec une pertinence pour des phénotypes associés à la colite et des mécanismes pathogènes dépendants du microbiome.
Mucin 2/MUC2 Le plasmide double nickase (m) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus Muc2 dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de Muc2. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de Muc2. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de Muc2.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.