Mucin 17 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-404622

Descripción general

MUC17 codifica la mucina 17, una mucina anclada a la membrana y fuertemente O‑glicosilada, enriquecida en la superficie apical de las células epiteliales gastrointestinales, donde contribuye a la barrera mucosa y a la homeostasis epitelial. La mucina 17 favorece la hidratación de la superficie celular, la exclusión de patógenos y la protección frente al estrés mecánico y químico, y puede modular la adhesión y la señalización celulares mediante interacciones en el glucocálix. Se han descrito alteraciones en la expresión de MUC17 y en sus patrones de glicosilación en trastornos inflamatorios del intestino y en neoplasias epiteliales, lo que vincula a esta mucina con vías que regulan la integridad de la barrera, la diferenciación y las respuestas al estrés. Como componente de la interfaz de defensa epitelial, MUC17 se estudia con frecuencia en modelos de inflamación mucosa, interacciones huésped–microbio y cambios asociados a tumores en la arquitectura de las glicoproteínas.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO Mucin 17 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen MUC17 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del MUC17 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de MUC17 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína Mucin 17.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en MUC17 para la investigación de la señalización de Mucin 17, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de MUC17 críticos para la función de Mucin 17
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de MUC17 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido Mucin 17 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido Mucin 17 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus MUC17. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR Mucin 17 (h) y el plásmido HDR Mucin 17 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología MUC17 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana MUC17 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.