MRP1 Plasmide Double Nickase (m): sc-421613-NIC
- Specie Target: mouse
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- MRP1 Plasmide Double Nickase (m) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il MRP1 Double Nickase Plasmid (m) e il MRP1 Double Nickase Plasmid (m2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira Abcc1. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: MRP1 Antibody (IU2H10): sc-53130
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
MRP1 Plasmide Double Nickase (m) | sc-421613-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
MRP1 Plasmide Double Nickase (m2) | sc-421613-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Il gene murino **Abcc1** codifica la **multidrug resistance–associated protein 1** (MRP1/ABCC1), un trasportatore della famiglia **ABC** (ATP-binding cassette) che esporta attraverso la membrana plasmatica un’ampia gamma di anioni organici, coniugati del glutatione e del glucuronide, e mediatori lipidici. MRP1 contribuisce alla detossificazione cellulare e all’omeostasi redox accoppiando l’efflusso di xenobiotici al metabolismo dipendente dal glutatione, influenzando la segnalazione intracellulare tramite la regolazione del trasporto di leucotrieni e prostaglandine. Questo trasportatore si interseca con vie coinvolte nelle risposte allo stress ossidativo, nella segnalazione infiammatoria e nella funzione di barriera, ed è frequentemente studiato nel contesto dei fenotipi di resistenza a più farmaci in modelli di cancro. Abcc1 rappresenta inoltre un nodo funzionale utile per indagare la variabilità farmacocinetica e i processi di trasporto tessuto-specifici nei sistemi murini.
MRP1 Il plasmide Double Nickase (m) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus Abcc1 nelle linee cellulari mouse. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di Abcc1. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di Abcc1. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con Abcc1 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.