MRP1 Plasmide Double Nickase (h): sc-400456-NIC

ABCC1 codifica la proteina umana associata alla resistenza ai farmaci 1 (MRP1), un trasportatore della famiglia ATP-binding cassette (ABC) che media l'efflusso ATP-dipendente di anioni organici, xenobiotici e metaboliti coniugati con glutatione, glucuronide e solfato. MRP1 contribuisce alla detossificazione cellulare e all'omeostasi redox regolando l'equilibrio intracellulare del glutatione e il trasporto del leucotriene C4 e di altri mediatori infiammatori. Attraverso il suo ruolo nel trasporto di membrana e nelle vie di risposta allo stress, l'attività di ABCC1 influenza la distribuzione intracellulare dei farmaci, la gestione dello stress ossidativo e le funzioni di barriera in diversi tessuti. Un'espressione o una funzione disregolata di ABCC1/MRP1 è spesso studiata nel contesto di fenotipi di resistenza multidrug, della segnalazione infiammatoria e di alterazioni nel trasporto di metaboliti osservate in molteplici modelli di malattia.

MRP1 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus ABCC1 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di ABCC1. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di ABCC1. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.

Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con ABCC1 interrotto.

Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.