Plásmido Doble Nickase (h) MRNIP: sc-412131-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)MRNIP consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa MRNIP (h) y el plásmido de doble nickasa MRNIP (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a MRNIP. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: MRNIP Anticuerpo (H-11): sc-390012
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) MRNIP | sc-412131-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) MRNIP | sc-412131-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
MRNIP (proteína que interactúa con MRE11-RAD50-NBS1) es un factor nuclear implicado en la respuesta al daño del ADN mediante su asociación funcional con el complejo MRN, que coordina la detección y el procesamiento de roturas de doble cadena del ADN. Al modular la señalización dependiente de MRN y la dinámica de resección de los extremos, MRNIP contribuye a la estabilidad del genoma durante el estrés replicativo e influye en la activación de los puntos de control y en la elección de la vía de reparación. La alteración de componentes de la vía MRN se asocia ampliamente con fenotipos de inestabilidad cromosómica y con una sensibilidad modificada a agentes genotóxicos, lo que convierte a MRNIP en un nodo útil para estudiar la organización de las redes de reparación del ADN. La investigación sobre MRNIP es relevante para los mecanismos que subyacen a la acumulación de mutaciones, la aneuploidía y los defectos del ciclo celular observados en diversos contextos de enfermedad.
MRNIP El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus MRNIP en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de MRNIP. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de MRNIP. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con MRNIP alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.