mPRα Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-402143

Descripción general

PAQR7 codifica el receptor de progesterona de membrana alfa (mPRα), un receptor de progestágenos de siete dominios transmembrana de la familia PAQR que media la señalización rápida y no genómica de la progesterona en la membrana plasmática y en membranas intracelulares. mPRα influye en procesos celulares como la señalización por nucleótidos cíclicos, las cascadas de quinasas, el flujo de calcio y la regulación de la apoptosis y la motilidad celular, con efectos dependientes del contexto sobre programas transcripcionales a través de vías posteriores de segundos mensajeros. Se ha descrito la expresión de PAQR7 en tejidos reproductivos y no reproductivos, lo que respalda funciones en la respuesta a hormonas esteroideas, la regulación neuroendocrina y la señalización inmunitaria y epitelial. La señalización desregulada de mPRα se ha investigado en biología sensible a hormonas y en contextos relevantes para enfermedad, como trastornos reproductivos y modelos de cáncer asociado a hormonas, donde una respuesta alterada a la progesterona puede afectar la proliferación, la invasión y las vías de adaptación al estrés.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO mPRα (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen PAQR7 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del PAQR7 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de PAQR7 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína mPRα.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en PAQR7 para la investigación de la señalización de mPRα, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de PAQR7 críticos para la función de mPRα
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de PAQR7 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido mPRα CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido mPRα CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus PAQR7. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR mPRα (h) y el plásmido HDR mPRα (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología PAQR7 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana PAQR7 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.