Plásmido Doble Nickase (h) MLL3: sc-402052-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)MLL3 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa MLL3 (h) y el plásmido de doble nickasa MLL3 (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a KMT2C. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) MLL3 | sc-402052-NIC | 20 µg | $410.00 |
KMT2C (MLL3) codifica una metiltransferasa de histonas que contiene un dominio SET y que cataliza predominantemente la monometilación de H3K4 en potenciadores (enhancers), moldeando la accesibilidad de la cromatina y programas transcripcionales específicos del contexto. Como componente central de complejos reguladores tipo COMPASS, MLL3 coordina la comunicación entre potenciadores y promotores e integra señales de factores de transcripción determinantes del linaje durante el desarrollo y la diferenciación. La alteración de KMT2C perturba la arquitectura de los potenciadores y la homeostasis transcripcional, afectando vías vinculadas a la respuesta al daño del ADN, el control del ciclo celular y las decisiones de destino celular. Las alteraciones de KMT2C son recurrentes en múltiples tipos de cáncer y en trastornos del neurodesarrollo, lo que convierte a MLL3 en un nodo clave para estudiar la desregulación epigenética.
MLL3 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus KMT2C en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de KMT2C. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de KMT2C. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con KMT2C alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.