Datos CRISPR no: la imagen ilustra la calidad de los anticuerpos para visualizar los resultados de los experimentos CRISPR.
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MISR II Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-402523
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- MISR II El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico MISR II, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: MISR II Anticuerpo (D-9): sc-377413
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
MISR II Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-402523 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
AMHR2 codifica el receptor humano de la hormona antimülleriana tipo 2 (MISR II), una quinasa transmembrana de serina/treonina que se une a la AMH e inicia la señalización a través de SMAD1/5/8 para regular programas de desarrollo en el conducto de Müller y la diferenciación gonadal. La activación del receptor coordina respuestas transcripcionales implicadas en decisiones de destino celular, remodelación tisular y maduración del tracto reproductor, integrándose con la dinámica más amplia de la vía TGF-β/BMP. La desregulación de la señalización AMH–AMHR2 se ha asociado con trastornos del desarrollo sexual y fenotipos de endocrinología reproductiva, y la expresión alterada de MISR II se ha investigado en contextos tumorales derivados del ovario y de otros linajes müllerianos. Como nodo de la vía, AMHR2 es útil para estudiar la señalización del receptor dependiente de ligando, la regulación génica mediada por SMAD y respuestas de crecimiento y diferenciación específicas del contexto.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO MISR II (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen AMHR2 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del AMHR2 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de AMHR2 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína MISR II.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en AMHR2 para la investigación de la señalización de MISR II, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de AMHR2 críticos para la función de MISR II
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de AMHR2 para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido MISR II CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido MISR II CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus AMHR2. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR MISR II (h) y el plásmido HDR MISR II (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología AMHR2 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana AMHR2 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.