Date published: 2025-9-7

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MIAT Plasmidi CRISPR (h)

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Schede Tecniche
  • Specie target: human; corrispondente al mouse prodotto, veda MIAT CRISPR Plasmids (m)
  • I plasmidi CRISPR/Cas9 KO consistono in sequenze RNA guida di 20 nt specifici MIAT derivate dalla libreria GeCKO (v2)
  • Per il silenziamento genico CRISPR, le sequenze gRNA indirizzano la proteina CAS9 ad indurre una doppia rottura sito-specifica dei filamenti (DSB) nel DNA genomico
  • Plasmidi CRISPR Target-specifici sia per knockout genico che attivazione sono disponibili. Si prega di fare riferimento alle informazioni dettagliate nelle schede tecniche dei prodotti below
  • Tutti i prodotti sono venduti come DNA plasmidico purificato, pronto per la trasfezione, con l'esclusione delle particelle lentivirali d'attivazione che sono state preimpacchettate come Particelle lentivirali per l'utilizzo in cellule di difficile trasfezione

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    Description

    • 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
    • MIAT Plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) consiste di un pool di tre plasmidi ciascuno codificante per la nucleasi Cas9 e un RNA guida 20 nt specifico MIAT (gRNA) disegnato per una massima efficienza di knockout
    • le sequenze gRNA sono derivate dalla libreria GeCKO (v2) e dirigono la proteina Cas9 ad indurre un rottura double strand (DSB) sito-specifica nel DNA genomico (%link_11%)
    • Per la selezione delle cellule contenenti un DSB indotto con successo da Cas-9, è raccomandata la co-trasfezione con il MIAT Plasmide HDR (h) (sc-437346-HDR).
    • contattare il Servizio Tecnico per la disponibilità dell'anticorpo di controllo

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    Description

    • 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
    • MIAT Plasmide HDR (h) è raccomandato per co-trasfezione con MIAT Plasmide CRISPR/Cas9 KO (h)
    • MIAT HDR Plasmid (h) consiste in un pool di 2-3 plasmidi, ciascuno contenente un templato per riparazione di DNA homology-directed (HDR) corrispondente ai siti di taglio generati dal MIAT Plasmide CRISPR/Cas9 KO (h)
    • Ciascun plasmide HDR contiene due braccia di omologia da 800 bp disegnate per legare specificamente il DNA genomico che circonda il corrispondente sito di rottura DNA double strand indotto dal Cas9
    • Ciascun Plasmide HDR inserisce un gene di resistenza alla puromicina per inattivare la selezione di cellule stabilmente knockout (KO) ed un gene RFP (Red Fluorescent Protein) per verificare visivamente la trasfezione
    • Il gene per la resistenza alla puromicina e per RFP sono affiancati da due siti LoxP per permettere l'ulteriore processamento da parte del Cre Vector sc-418923

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    Description

    • 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
    • MIAT Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
    • Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
    • Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
    • I gRNA codificati da MIAT Plasmide Double Nickase (h2) differiscono dai gRNA in MIAT Plasmide Double Nickase (h)

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    Description

    • 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
    • MIAT Plasmide di attivazione CRISPR (h) è un mediatore sinergico di attivazione (SAM) del sistema di attivazione trascrizionale disegnato per upregolare specificatamente l'espressione genica
    • MIAT CRISPR Activation Plasmid (h) consiste di tre plasmidi in proporzione 1:1:1 : un plasmide che codifica la nucleasi (D10A and N863A) Cas9 (dCas9) deattivata fusa al dominio di transattivazione VP64, ed un gene di resistenza alla blasticina; un plasmide che codifica per la proteina di fusione MS2-p65-HSF1, ed un gene di resistenza all'igromicina;un plasmide che codifica un RNA guida di 20 nt target specifico, e un gene di resistenza alla puromicina.
    • Il complesso SAM legae una regione sito-specifica circa 200-250 nt a monte del sito di start trascrizionale e fornisce un robusto reclutamento di fattori trascrizionali per un'attivazione altamente efficiente del gene target

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    Description

    • 200 µl della soluzione virale contengono 1x 106 particelle virali infettive (IFU), sufficienti per 10-20 trasduzioni.
    • Le particelle lentivirali vengono fornite come particelle virali per il silenziamento genico pronte per la trasduzione
    • Le particelle lentivirali contengono di regola da tre a cinque vettori di espressione, che codificano ciascuno per un shRNA specifico di 19-25 nt (plus hairpins) progettato per ridurre l'espressione genica
    • le sequenze di shRNA corrispondono a MIAT siRNA Gene Silencer sequences
    • Dopo la trasduzione le linee cellulari che esprimono shRNA in modo stabile possono essere selezionate tramite un trattamento con puromicina.
    • Informazioni di biosicurezza - Le particelle lentivirali non sono in grado di replicarsi e sono disegnate in modo tale da inattivarsi dopo la traduzione e l'integrazione dei costrutti shRNA nel DNA genomico delle cellule target.
    • Le particelle lentivirali sono destinate ad un uso non-commerciale.

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    Nome del prodottoCodice del prodottoUNITÀPrezzoQuantitàPreferiti

    MIAT Plasmide KO CRISPR/Cas9 (h)

    sc-437346
    20 µg
    $390.00

    MIAT Plasmide HDR (h)

    sc-437346-HDR
    20 µg
    $437.00

    MIAT Plasmide Double Nickase (h)

    sc-437346-NIC
    20 µg
    $402.00

    MIAT Plasmide Double Nickase (h2)

    sc-437346-NIC-2
    20 µg
    $402.00

    MIAT Plasmide di attivazione CRISPR (h)

    sc-437346-ACT
    20 µg
    $390.00

    MIAT Plasmide di attivazione CRISPR (h2)

    sc-437346-ACT-2
    20 µg
    $390.00

    MIAT Particelle di Attivazione Lentivirale (h)

    sc-437346-LAC
    200 µl
    $447.00

    MIAT Particelle di Attivazione Lentivirale (h2)

    sc-437346-LAC-2
    200 µl
    $447.00