Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Plásmido Doble Nickase (m) Mfn2/Mitofusin 2: sc-431291-NIC
- Especies Diana: mouse
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (m)Mfn2/Mitofusin 2 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa Mfn2/Mitofusin 2 (m) y el plásmido de doble nickasa Mfn2/Mitofusin 2 (m2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a Mfn2. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: Mfn2/Mitofusin 2 Anticuerpo (XX-1): sc-100560
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (m) Mfn2/Mitofusin 2 | sc-431291-NIC | 20 µg | $410.00 |
Mfn2 (mitofusina 2) es una GTPasa tipo dinamina anclada en la membrana mitocondrial externa que media la fusión mitocondrial y ayuda a mantener la arquitectura de la red mitocondrial en células de ratón. Más allá del anclaje de membranas, MFN2 contribuye a los sitios de contacto entre mitocondrias y retículo endoplásmico que coordinan el manejo de calcio, el intercambio de lípidos y la bioenergética mitocondrial, vinculándola con las respuestas al estrés celular y la regulación metabólica. La alteración de Mfn2 perturba la dinámica mitocondrial y puede modificar la mitofagia, el equilibrio de especies reactivas de oxígeno y la sensibilidad a la apoptosis. Estas funciones hacen de Mfn2 un objetivo ampliamente utilizado en estudios de neurodegeneración, disfunción cardiometabólica y remodelado mitocondrial asociado a la inflamación, tanto in vivo como en sistemas murinos en cultivo.
Mfn2/Mitofusin 2 El plásmido de doble nicasa (m) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus Mfn2 en líneas celulares mouse. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de Mfn2. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de Mfn2. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con Mfn2 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.