Plásmido Doble Nickase (h) METTL11A: sc-412015-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)METTL11A consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa METTL11A (h) y el plásmido de doble nickasa METTL11A (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a NTMT1. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) METTL11A | sc-412015-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) METTL11A | sc-412015-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
NTMT1 codifica la metiltransferasa N-terminal humana METTL11A, una enzima dependiente de SAM que cataliza la α-N-metilación de los extremos N de las proteínas tras la eliminación de la metionina iniciadora. Esta metilación N-terminal puede influir en las interacciones proteína–proteína, la estabilidad y la localización subcelular, vinculando a METTL11A con la proteostasis y con la regulación de la señalización y de procesos nucleares. La actividad de METTL11A se interseca con redes regulatorias más amplias dependientes de la metilación, incluidas vías asociadas a la cromatina y de respuesta al estrés, mediante la modulación de sustratos metilados. La desregulación de la metilación N-terminal se ha asociado con programas alterados de crecimiento y diferenciación celular, lo que convierte a NTMT1 en un locus útil para estudios mecanísticos de fenotipos impulsados por la metilación y del reajuste de vías en modelos relevantes para enfermedad.
METTL11A El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus NTMT1 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de NTMT1. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de NTMT1. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con NTMT1 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.