Plásmido Doble Nickase (h) METT11D1: sc-413022-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)METT11D1 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa METT11D1 (h) y el plásmido de doble nickasa METT11D1 (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a METTL17. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) METT11D1 | sc-413022-NIC | 20 µg | $410.00 |
METTL17 humano (también conocido como METT11D1) codifica una presunta metiltransferasa dependiente de S-adenosilmetionina, que se ha vinculado con la expresión génica mitocondrial y el mantenimiento de la capacidad de fosforilación oxidativa. La evidencia procedente de la genómica funcional respalda un papel en la regulación de la traducción mitocondrial y/o de procesos asociados al ribosoma que influyen en el ensamblaje de la cadena respiratoria, la producción de ATP y el equilibrio redox celular. Por lo tanto, la alteración de METTL17 es relevante para vías que controlan la proteostasis mitocondrial, el metabolismo energético y las respuestas de señalización al estrés. La disfunción mitocondrial es una característica recurrente en contextos de investigación sobre neurodegeneración, metabolismo y cáncer, lo que convierte a METTL17 en un objetivo útil para estudios mecanísticos de la homeostasis mitocondrial.
METT11D1 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus METTL17 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de METTL17. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de METTL17. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con METTL17 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.