Plasmide Double Nickase (h) MESDC2: sc-406189-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) MESDC2 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide MESDC2 Double Nickase (h) et le plasmide MESDC2 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant MESDC2. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) MESDC2 | sc-406189-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) MESDC2 | sc-406189-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
MESDC2 (mesoderm development candidate 2) code une chaperonne résidente du réticulum endoplasmique qui s’associe à LRPAP1 pour favoriser le repliement, la maturation et l’export du RE de protéines apparentées au récepteur des LDL, en particulier LRP5 et LRP6. En permettant l’assemblage et le trafic corrects de ces co-récepteurs de Wnt, MESDC2 influence la signalisation canonique Wnt/β-caténine et les programmes en aval qui gouvernent les décisions de destinée cellulaire, le développement et l’homéostasie tissulaire. Une altération de la fonction de MESDC2 est donc pertinente pour la recherche sur les dérégulations de la voie Wnt, notamment dans des contextes tels que des anomalies du développement et le remodelage de la signalisation associé au cancer. Son rôle dans le contrôle qualité des récepteurs de la voie sécrétoire fait également de MESDC2 un nœud utile pour étudier la protéostasie du RE et la biogenèse des récepteurs.
MESDC2 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus MESDC2 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de MESDC2. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de MESDC2. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de MESDC2.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.