Meis1 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-401481

Descripción general

MEIS1 codifica Meis1, un factor de transcripción homeobox de la familia TALE que coopera con las proteínas HOX y PBX para controlar programas de expresión génica que regulan el patrón embrionario, la diferenciación hematopoyética y la determinación del destino celular. Meis1 influye en redes transcripcionales asociadas a la cromatina implicadas en la proliferación, la especificación de linaje y el mantenimiento de células madre/progenitoras, con funciones dependientes del contexto en distintos tejidos. La regulación alterada de MEIS1 se ha relacionado con hematopoyesis desregulada y circuitos transcripcionales oncogénicos en la leucemia, y los estudios de asociación genética implican a MEIS1 en rasgos vinculados a la neurobiología, como el síndrome de piernas inquietas. Como regulador nuclear, MEIS1 se utiliza ampliamente como modelo para estudiar redes reguladoras del desarrollo y la cooperación entre factores de transcripción.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO Meis1 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen MEIS1 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del MEIS1 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de MEIS1 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína Meis1.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en MEIS1 para la investigación de la señalización de Meis1, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de MEIS1 críticos para la función de Meis1
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de MEIS1 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido Meis1 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido Meis1 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus MEIS1. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR Meis1 (h) y el plásmido HDR Meis1 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología MEIS1 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana MEIS1 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.