MDFIC CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m): sc-421259

Übersicht

Mouse Mdfic kodiert MDFIC, ein MyoD-Familien‑Inhibitor‑ähnliches nukleäres Protein, das an der Transkriptionsregulation und der Modulation linienspezifischer Genexpressionsprogramme beteiligt ist. Es wurde berichtet, dass MDFIC die Aktivität von bHLH‑Transkriptionsfaktoren beeinflusst und mit der Kontrolle von Zelldifferenzierungszuständen sowie proliferationsbezogenen transkriptionellen Outputs verknüpft ist. Über diese regulatorischen Funktionen kann MDFIC mit Signalwegen interagieren, die Entwicklungsgen-Netzwerke sowie kontextabhängige Stress- oder Wachstumsantworten steuern. Eine veränderte MDFIC‑Expression oder ‑Funktion wurde in der Literatur mit einer dysregulierten transkriptionellen Kontrolle in Verbindung gebracht, die für die Krebsbiologie und Entwicklungsphänotypen relevant ist, was seinen Wert als mechanistisches Forschungsziel unterstreicht.

Das MDFIC CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des Mdfic-Gens in mouse-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des Mdfic-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.

Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von Mdfic nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die MDFIC-Proteinexpression aufheben.

Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von Mdfic-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der MDFIC-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.

Hauptmerkmale

• sgRNAs, die auf Mdfic-Exone abzielen, die für die MDFIC-Funktion entscheidend sind
  Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
  GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
  Pool von Plasmiden, die auf mehrere Mdfic-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
  Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion

Designvarianten

CRISPRs +/- HDRs

• gRNAs, die vom MDFIC CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m) und vom MDFIC CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des Mdfic-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
  HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das MDFIC HDR-Plasmid (m) und MDFIC HDR-Plasmid (m2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von Mdfic-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten Mdfic-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.