MCM3AP CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h): sc-406369

Übersicht

MCM3AP (MCM3-assoziiertes Protein) ist ein multifunktionaler nukleärer Faktor, der mit dem MCM2–7-Helikasekomplex interagiert und zur Regulation der DNA-Replikation sowie des Zellzyklusfortschritts beiträgt. Es wurde mit Prozessen in Verbindung gebracht, die die Replikationslizenzierung mit der transkriptionellen Kontrolle und dem RNA-Stoffwechsel koordinieren, was auf Funktionen in der Genomerhaltung und der proliferativen Kapazität hinweist. Eine Störung oder veränderte Expression von MCM3AP wurde im Kontext von Replikationsstress, chromatinassoziierter Signalgebung und zellulären Antworten auf DNA-Schäden untersucht, die die genomische Stabilität beeinflussen. Diese Mechanismen werden häufig in der Krebsbiologie und anderen proliferativen Erkrankungen untersucht, in denen Konflikte zwischen Replikation und Transkription sowie Checkpoint-Fehlfunktionen zentrale Forschungsthemen sind.

Das MCM3AP CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des MCM3AP-Gens in human-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des MCM3AP-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.

Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von MCM3AP nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die MCM3AP-Proteinexpression aufheben.

Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von MCM3AP-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der MCM3AP-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.

Hauptmerkmale

• sgRNAs, die auf MCM3AP-Exone abzielen, die für die MCM3AP-Funktion entscheidend sind
  Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
  GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
  Pool von Plasmiden, die auf mehrere MCM3AP-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
  Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion

Designvarianten

CRISPRs +/- HDRs

• gRNAs, die vom MCM3AP CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) und vom MCM3AP CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des MCM3AP-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
  HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das MCM3AP HDR-Plasmid (h) und MCM3AP HDR-Plasmid (h2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von MCM3AP-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten MCM3AP-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.