MC5-R Double Nickase Plasmid (h): sc-403844-NIC
- Zielspezies: human
- 20 µg transfektionsfertige, aufgereinigte Plasmid DNA; geeignet für 20 Transfektionen
- Das MC5-R Double Nickase Plasmid (h) wird als Plasmid-Paar geliefert. Die einzelnen Plasmide kodieren für eine D10A mutierte Cas9 Nuklease sowie für je eine unterschiedliche, zielspezifische 20nt guide RNA (gRNA) Sequenz. Dies erlaubt eine hohe Knockout-Effizienz bei gleichzeitig größerer Spezifität als das entsprechende CRISPR/Cas9 KO Plasmid
- gRNA Sequenzpaare liegen ca. 20 bp auseinander um ein spezifisches Cas9-vermitteltes "Double Nicking" der genomischen DNA zu erlauben und so im Resultat den Effekt eines Doppelstrangbruchs nachzuahmen.
- Ein Plasmid kodiert für ein Puromycin-Resistenzgen zur Selektion von stabilen Knockout-Zellen. Das andere Plasmid kodiert für ein GFP-Gen für den visuellen Nachweis der Transfektion
- MC5-R Double-Nickase-Plasmid (h) und MC5-R Double-Nickase-Plasmid (h2) kodieren unterschiedliche gepaarte gRNA-Designs, die auf MC5R abzielen. Möglicherweise ist eines oder sind beide Designs verfügbar
Bestellinformation
| Produkt | Katalog # | EINHEIT | Preis | ANZAHL | Favoriten | |
MC5-R Double Nickase Plasmid (h) | sc-403844-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
MC5-R Double Nickase Plasmid (h2) | sc-403844-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Das humane Gen **MC5R** kodiert den Melanocortinrezeptor 5 (MC5-R), einen G‑Protein‑gekoppelten Rezeptor, der durch Melanocortinpeptide wie α‑MSH und ACTH aktiviert wird. MC5-R signalisiert hauptsächlich über **Gs**, erhöht dadurch den intrazellulären **cAMP**-Spiegel und aktiviert **PKA/CREB**-abhängige Transkriptionsprogramme, mit nachgeschalteten Effekten auf den zellulären Stoffwechsel, die sekretorische Aktivität und die Immunmodulation – jeweils gewebespezifisch. Die MC5R-Aktivität wird mit der Regulation exokriner Drüsenfunktionen, der Lipidverarbeitung und inflammatorischer Signalwege in Verbindung gebracht, und eine veränderte Grundaktivität des Melanocortinwegs wird im Kontext metabolischer und immunassoziierter Erkrankungen untersucht. Da Melanocortinrezeptoren neuroendokrine Signale mit peripheren Antworten verknüpfen, dient MC5R als hilfreicher Knotenpunkt zur Analyse von GPCR-Signaldynamiken und cAMP-gesteuerten Gennetzwerken.
MC5-R Das Double-Nickase-Plasmid (h) besteht aus einem aufeinander abgestimmten Plasmidpaar, das für die hochspezifische Bearbeitung des MC5R-Lokus in human-Zelllinien entwickelt wurde. Jedes Plasmid exprimiert eine Cas9-D10A-Nickase und eine spezifische sgRNA, die auf entgegengesetzte DNA-Stränge innerhalb von MC5R abzielt. Wenn sie auf benachbarte Stellen auf entgegengesetzten DNA-Strängen gerichtet sind, erzeugen die beiden Nickasen versetzte Einzelstrang-Schnitte, die zusammen einen versetzten Doppelstrangbruch erzeugen, was eine koordinierte On-Target-Aktivität beider Guides erfordert. Der resultierende DNA-Bruch wird durch endogene zelluläre Reparaturwege behoben, meist durch nicht-homologe Endverknüpfung (NHEJ), was zu Insertionen oder Deletionen führt, die die MC5R-Funktion stören. Durch die Notwendigkeit einer doppelten sgRNA-Bindung am Zielort erhöht der Doppel-Nick-Ansatz die Spezifität der Bearbeitung und bietet eine komplementäre CRISPR-Strategie für Anwendungen, bei denen eine zusätzliche Kontrolle über die Zielgenauigkeit gewünscht ist.
Um eine effiziente Identifizierung editierter Zellen zu unterstützen, kodiert ein Plasmid GFP zur fluoreszierenden Visualisierung transfizierter Populationen, während das Begleitplasmid ein Puromycin-Resistenzgen für die Antibiotika-Selektion trägt. Zusammen unterstützen diese Merkmale eine effiziente Anreicherung co-transfizierter Populationen und vereinfachen die Validierung von Klonen mit MC5R-Störung.
Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.