Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Plásmido Doble Nickase (h) MAT Iα: sc-405476-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)MAT Iα consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa MAT Iα (h) y el plásmido de doble nickasa MAT Iα (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a MAT1A. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) MAT Iα | sc-405476-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) MAT Iα | sc-405476-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
MAT1A codifica la metionina adenosiltransferasa I alfa (MAT Iα), una enzima enriquecida en el hígado que cataliza la conversión de metionina y ATP en S-adenosilmetionina (SAM), el principal donador de metilos para las reacciones de metilación de ADN, ARN, proteínas y lípidos. Al regular la disponibilidad intracelular de SAM, MAT Iα conecta el metabolismo de la metionina y del carbono de un solo átomo con la regulación epigenética, la homeostasis redox y la biosíntesis de poliaminas. La alteración de la expresión o la actividad de MAT1A puede perturbar el potencial de metilación y el flujo metabólico, procesos que se examinan con frecuencia en estudios de disfunción hepática, reprogramación metabólica y fenotipos asociados a la metilación. Como resultado, MAT1A se utiliza ampliamente para investigar las conexiones entre la detección de nutrientes, el estado de la cromatina y los programas transcripcionales posteriores en células humanas.
MAT Iα El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus MAT1A en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de MAT1A. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de MAT1A. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con MAT1A alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.