Datos CRISPR no: la imagen ilustra la calidad de los anticuerpos para visualizar los resultados de los experimentos CRISPR.
Datos CRISPR no: la imagen ilustra la calidad de los anticuerpos para visualizar los resultados de los experimentos CRISPR.
MAT Iα Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-419102
- Especies Diana: mouse
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- MAT Iα El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico MAT Iα, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
MAT Iα Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-419102 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
Mat1a codifica la metionina adenosiltransferasa I alfa (MAT Iα), la principal enzima hepática que cataliza la síntesis de S-adenosil-L-metionina (SAM), el donador de metilos principal para las reacciones de metilación de ADN, ARN, proteínas y lípidos. Mediante el control del equilibrio SAM/SAH, MAT Iα vincula el metabolismo de la metionina con el metabolismo de un carbono, la transulfuración y la homeostasis redox, e influye en la regulación epigenética y en la capacidad global de metilación. La actividad alterada de MAT1A se asocia con la disrupción de programas de expresión génica dependientes de la metilación y de respuestas al estrés metabólico, lo que la hace relevante para estudios de fisiología hepática, diferenciación de hepatocitos y mecanismos de disfunción metabólica.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO MAT Iα (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Mat1a en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Mat1a junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Mat1a tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína MAT Iα.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Mat1a para la investigación de la señalización de MAT Iα, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de Mat1a críticos para la función de MAT Iα
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Mat1a para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido MAT Iα CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido MAT Iα CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Mat1a. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR MAT Iα (m) y el plásmido HDR MAT Iα (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Mat1a para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Mat1a definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.