MAGE-C2 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h): sc-405516

Übersicht

MAGEC2 kodiert das Melanom-assoziierte Antigen C2 (MAGE-C2), ein Krebs-Hoden-Antigen mit auf Keimbahngewebe beschränkter Expression in normalen Geweben und häufiger Re-Expression in verschiedenen Tumoren. MAGE-C2 ist an der Proteinhomöostase beteiligt, indem es ubiquitinabhängige Prozesse einbindet, einschließlich der Modulation der E3-Ligase-Aktivität durch Interaktionen mit RING-Domänen-Partnern, und dadurch die Stabilität von Signal- und Zellzyklusregulatoren beeinflusst. Eine dysregulierte MAGE-C2-Expression wurde mit veränderter Proliferation, Stressantworten und Transkriptionsprogrammen in Verbindung gebracht, die mit maligner Progression und Immunerkennung assoziiert sind. Als tumorassoziiertes Antigen wird es breit im Kontext der Antigenpräsentation sowie als molekulares Korrelat des Tumorphänotyps und von Pathway-„Rewiring“ untersucht.

Das MAGE-C2 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des MAGEC2-Gens in human-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des MAGEC2-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.

Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von MAGEC2 nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die MAGE-C2-Proteinexpression aufheben.

Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von MAGEC2-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der MAGE-C2-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.

Hauptmerkmale

• sgRNAs, die auf MAGEC2-Exone abzielen, die für die MAGE-C2-Funktion entscheidend sind
  Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
  GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
  Pool von Plasmiden, die auf mehrere MAGEC2-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
  Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion

Designvarianten

CRISPRs +/- HDRs

• gRNAs, die vom MAGE-C2 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) und vom MAGE-C2 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des MAGEC2-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
  HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das MAGE-C2 HDR-Plasmid (h) und MAGE-C2 HDR-Plasmid (h2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von MAGEC2-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten MAGEC2-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.