LTBP-4 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-405419

Descripción general

LTBP4 codifica la proteína 4 de unión al factor de crecimiento transformante beta latente (LTBP-4), una glicoproteína de la matriz extracelular que se asocia con las microfibrillas de fibrilina y regula el secuestro, el almacenamiento y la biodisponibilidad de los complejos latentes de TGF-β. A través de estas interacciones, LTBP-4 influye en la dinámica de señalización de la vía de TGF-β y contribuye a los programas de ensamblaje y remodelación de la matriz que determinan la adhesión celular, la mecanotransducción y la elasticidad tisular. La función de LTBP4 está estrechamente ligada a la homeostasis de las fibras elásticas mediante la coordinación con la elastina y los componentes microfibrilares, afectando la integridad estructural de los tejidos conectivos. La disrupción genética o la expresión alterada de LTBP4 se ha implicado en fenotipos del tejido conectivo y cardiopulmonares, lo que respalda su relevancia para estudios de biología de la matriz extracelular y de mecanismos de enfermedad dependientes de TGF-β.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO LTBP-4 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen LTBP4 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del LTBP4 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de LTBP4 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína LTBP-4.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en LTBP4 para la investigación de la señalización de LTBP-4, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de LTBP4 críticos para la función de LTBP-4
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de LTBP4 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido LTBP-4 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido LTBP-4 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus LTBP4. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR LTBP-4 (h) y el plásmido HDR LTBP-4 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología LTBP4 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana LTBP4 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.