Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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LSP1 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-406808
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- LSP1 El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico LSP1, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: LSP1 Anticuerpo (TDP153): sc-53363
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
LSP1 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-406808 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
La proteína 1 específica de linfocitos (LSP1) es un regulador del citoesqueleto que se une a la F-actina, enriquecido en leucocitos y células endoteliales, y que coordina la forma celular, la motilidad y la adhesión. Funciona en redes de señalización aguas abajo de receptores inmunitarios y señales de quimiocinas, influyendo en el tráfico dependiente de integrinas, la migración transendotelial y la organización espacial de la remodelación de actina en la corteza celular. A través de estas funciones, LSP1 contribuye a la dinámica de activación de los leucocitos, al comportamiento de las células presentadoras de antígeno y a las interacciones con la barrera vascular. La expresión o función desregulada de LSP1 se ha asociado con respuestas inflamatorias alteradas y fenotipos de migración de células inmunitarias relevantes para la inmunopatología y la biología de enfermedades hematológicas.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO LSP1 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen LSP1 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del LSP1 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de LSP1 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína LSP1.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en LSP1 para la investigación de la señalización de LSP1, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de LSP1 críticos para la función de LSP1
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de LSP1 para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido LSP1 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido LSP1 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus LSP1. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR LSP1 (h) y el plásmido HDR LSP1 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología LSP1 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana LSP1 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.