LSDP5 CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (m): sc-426297

개요

Perilipin 5(Plin5, PLIN5로도 표기), 즉 lipid storage droplet protein 5(LSDP5)는 지질방울(lipid droplet) 연관 단백질로, 세포 내 트라이아실글리세롤(triacylglycerol) 저장을 조절하고 β-산화를 위해 지방산이 미토콘드리아로 이동·수송되도록 조정합니다. 심장, 간, 골격근과 같은 마우스의 산화성 조직에서 PLIN5는 지질방울 표면에 대한 지질분해효소(lipase)의 접근을 조절하고, 지질 동원을 미토콘드리아의 산화 능력과 연계함으로써 지질 격리(sequestration)와 지질분해(lipolysis) 사이의 균형을 돕습니다. 이러한 기능을 통해 PLIN5는 에너지 항상성, 지질 유도 신호전달, 그리고 영양 공급 상태 및 단식에 대한 세포 반응에 영향을 미칩니다. PLIN5와 연관된 지질방울 동역학의 조절 이상은 미토콘드리아 기능과 염증 관련 대사 표현형에 영향을 주는 지방간(steatosis), 인슐린 저항성, 지질독성 스트레스(lipotoxic stress)의 실험 모델과 관련이 있습니다.

LSDP5 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m)는 mouse 세포주에서 Plin5 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 Plin5 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 Plin5의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 LSDP5 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 LSDP5 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 Plin5 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• LSDP5 기능에 중요한 Plin5 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 Plin5 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• LSDP5 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m) 및 LSDP5 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는 gRNA는 Plin5 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  LSDP5 HDR 플라스미드 (m) 및 LSDP5 HDR 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 Plin5 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 Plin5 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.