LRCH4 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-405444-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- LRCH4O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase LRCH4 (h) e o Plasmídeo Double Nickase LRCH4 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para LRCH4. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:LRCH4 Anticorpo (A-9): sc-377441
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
LRCH4 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-405444-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
LRCH4 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-405444-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
LRCH4 (repetições ricas em leucina e domínio de homologia com calponina contendo 4) codifica uma proteína citosólica caracterizada por domínios LRR e semelhantes a CH, comumente associados a interações proteína–proteína e à organização do citoesqueleto. Evidências emergentes relacionam membros da família LRCH à regulação da dinâmica da actina, do tráfego de membranas e da sinalização imune inata, com o LRCH4 implicado na modulação de vias inflamatórias proximais ao receptor, como respostas mediadas por TLR. Por meio desses processos, o LRCH4 pode influenciar a motilidade e a adesão celular, bem como programas transcricionais responsivos ao estresse em contextos imunes e epiteliais. Sinalização inflamatória desregulada e remodelamento do citoesqueleto são características recorrentes em diversos distúrbios imunomediados e na biologia do câncer, tornando o LRCH4 um alvo útil para estudos mecanísticos de vias.
LRCH4 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus LRCH4 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de LRCH4. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função LRCH4. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com LRCH4 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.