Plásmido Doble Nickase (h) LPLUNC3: sc-406344-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)LPLUNC3 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa LPLUNC3 (h) y el plásmido de doble nickasa LPLUNC3 (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a BPIFB3. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) LPLUNC3 | sc-406344-NIC | 20 µg | $410.00 |
BPIFB3 codifica LPLUNC3, una proteína secretada que contiene un pliegue del tipo “bactericidal/permeability-increasing” (BPI), enriquecida en epitelios mucosos, donde se la vincula con la defensa innata de la barrera y la regulación de la homeostasis de la superficie de las vías respiratorias y del tracto aerodigestivo superior. LPLUNC3 se asocia con programas de diferenciación epitelial y con las interacciones huésped–microbiota, con una posible influencia sobre redes de señalización inflamatoria que configuran la inmunidad mucosa. Se ha informado una expresión alterada de BPIFB3 en contextos de remodelado epitelial e inflamación, lo que respalda su uso como lectura molecular en biología de la vía aérea y en modelos relacionados con infecciones. El análisis funcional de BPIFB3 puede ayudar a aclarar cómo los factores secretados por el epitelio contribuyen a la actividad antimicrobiana, a los fenotipos de moco/secreción y al tono inflamatorio.
LPLUNC3 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus BPIFB3 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de BPIFB3. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de BPIFB3. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con BPIFB3 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.