Plásmido Doble Nickase (h) LONP2: sc-413504-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)LONP2 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa LONP2 (h) y el plásmido de doble nickasa LONP2 (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a LONP2. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) LONP2 | sc-413504-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) LONP2 | sc-413504-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
LONP2 codifica una proteasa peroxisomal dependiente de ATP de la familia Lon AAA+ que contribuye al control de calidad de los peroxisomas al reconocer, desplegar y degradar proteínas de la matriz dañadas o mal plegadas. Al mantener la proteostasis peroxisomal, LONP2 respalda procesos metabólicos lipídicos, incluida la β‑oxidación de ácidos grasos y la gestión de especies reactivas de oxígeno, que se entrecruzan con respuestas más amplias al estrés celular. La alteración de la función peroxisomal y el desequilibrio oxidativo se han implicado en fenotipos metabólicos y neurodegenerativos, lo que convierte a LONP2 en un nodo útil para estudiar vías que conectan el mantenimiento de orgánulos con la homeostasis celular. Por ello, el LONP2 humano es relevante para investigaciones sobre el metabolismo asociado a peroxisomas, el recambio proteico y la adaptación al estrés.
LONP2 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus LONP2 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de LONP2. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de LONP2. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con LONP2 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.