Plasmide Double Nickase (h) LOC100129480: sc-418668-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) LOC100129480 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide LOC100129480 Double Nickase (h) et le plasmide LOC100129480 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant MKRN2OS. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) LOC100129480 | sc-418668-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) LOC100129480 | sc-418668-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
MKRN2OS (humain) est un transcrit antisens/chevauchant associé au locus LOC100129480 et devrait participer à une régulation de l’expression génique spécifique de ce locus via des mécanismes médiés par l’ARN, tels que l’interférence transcriptionnelle, la modulation de la chromatine ou le contrôle de la stabilité des ARN. Le produit protéique annoté LOC100129480 demeure mal caractérisé, mais son contexte génomique suggère des liens potentiels avec la signalisation liée à l’ubiquitine et la régulation post‑transcriptionnelle, susceptibles d’influencer des décisions d’état cellulaire, notamment la prolifération, les réponses au stress et la différenciation. Une dérégulation de la transcription antisens et des réseaux d’ARN non codants est fréquemment observée dans le cancer et d’autres maladies complexes, ce qui fait de MKRN2OS/LOC100129480 une cible utile pour des études mécanistiques de la régulation génique au niveau de loci bidirectionnels ou chevauchants. Des analyses fonctionnelles peuvent aider à préciser comment ce locus affecte la maturation des ARN, les voies associées à la protéostase et les programmes transcriptionnels en aval dans des modèles cellulaires humains pertinents.
LOC100129480 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus MKRN2OS dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de MKRN2OS. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de MKRN2OS. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de MKRN2OS.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.