Plásmido Doble Nickase (m) LMO4: sc-421448-NIC
- Especies Diana: mouse
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (m)LMO4 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa LMO4 (m) y el plásmido de doble nickasa LMO4 (m2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a Lmo4. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: LMO4 Anticuerpo (4H8): sc-293440
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (m) LMO4 | sc-421448-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (m2) LMO4 | sc-421448-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Lmo4 codifica LIM domain only 4 (LMO4), una proteína adaptadora nuclear de tipo LIM-only que ensambla complejos transcripcionales multiproteicos y modula programas de expresión génica dependientes del contexto. En tejidos de ratón, LMO4 contribuye al patrón del desarrollo y a las decisiones de destino celular al coordinar interacciones entre socios de unión a LIM y otros reguladores transcripcionales, influyendo en procesos como la diferenciación, la proliferación y la función neuronal. LMO4 se ha vinculado con vías que controlan la regulación transcripcional y la integración de señales, incluidas redes implicadas en el desarrollo epitelial y neural. La actividad desregulada de LMO4 se ha asociado con un control transcripcional aberrante observado en modelos de tumorigenesis y fenotipos del neurodesarrollo, lo que respalda su uso como un nodo mecanístico en estudios de regulación génica.
LMO4 El plásmido de doble nicasa (m) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus Lmo4 en líneas celulares mouse. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de Lmo4. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de Lmo4. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con Lmo4 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.