LHX1 Lentiviral Activation Particles (h): sc-403100-LAC

LHX1 (LIM Homeobox 1) kodiert einen LIM-Domänen-Transkriptionsfaktor, der DNA-Bindung mit der Rekrutierung von Kofaktoren verbindet, um entwicklungsbezogene genregulatorische Netzwerke zu steuern. Es trägt zur Festlegung von Zellschicksalen und zu Programmen der Gewebemusterbildung bei, einschließlich Prozessen, die für frühe Embryogenese und Organogenese relevant sind, indem es transkriptionelle Module downstream von Morphogen-Signalwegen wie WNT-, BMP- und FGF-Signaling koordiniert. In der Humanbiologie wird eine veränderte Regulation von LHX1 mit angeborenen Entwicklungsanomalien in Verbindung gebracht und in Kontexten untersucht, in denen Linienidentität und Differenzierungszustände dysreguliert sind. Als nukleärer Regulator der Transkription wird LHX1 häufig als Marker und funktioneller Knotenpunkt in Studien zu Entwicklungssignalwegen, transkriptionellen Schaltkreisen und Linien-Reprogrammierung verwendet.

LHX1 Lentivirale Aktivierungspartikel (h) erfüllen diesen Bedarf, indem sie das vollständige Transkriptionsaktivierungssystem des Synergistic Activation Mediator (SAM) in transduktionsbereite, hoch-titrige lentivirale Partikel verpacken und so eine effiziente LHX1-Hochregulation über ein breiteres Spektrum menschlicher Zelltypen ermöglichen.

LHX1 Lentivirale Aktivierungspartikel (h) liefern alle funktionellen Komponenten des Synergistic Activation Mediator (SAM)-Systems über lentivirale Transduktion. Das System umfasst drei Partikelpräparate, die gemeinsam in Zielzellen transduziert werden: eines, das für katalytisch inaktives dCas9 (Mutationen D10A und N863A) kodiert, das mit der VP64-Transaktivierungsdomäne und einem Blasticidin-Resistenzgen fusioniert ist; eines, das für das MS2-p65-HSF1-Fusionsprotein mit einem Hygromycin-Resistenzgen kodiert; und eines, das für eine zielspezifische 20-nt-sgRNA kodiert, die an zwei MS2-RNA-Aptamere mit einem Puromycin-Resistenzgen fusioniert ist. Nach der lentiviralen Transduktion und der genomischen Integration der Expressionskassetten werden die SAM-Komponenten stabil exprimiert und lagern sich am Zielort innerhalb der proximalen Promotorregion stromaufwärts der LHX1-Transkriptionsstartstelle an, wo VP64, p65 und HSF1 kooperativ wirken, um endogene Transkriptionsmaschinerie zu rekrutieren und eine anhaltende Hochregulation der endogenen LHX1-Expression zu bewirken. Die Verwendung von nuklease-inaktivem dCas9 verhindert die Einführung von Doppelstrangbrüchen in der DNA und bewahrt den nativen LHX1-Genomlokus sowie die regulatorische Architektur.

Das lentivirale Format bietet mehrere praktische Vorteile: Die stabile genomische Integration unterstützt eine vererbbare Aktivierung über Zellteilungen hinweg; Partikelpräparate mit hohem Titer machen eine eigene Virusproduktion überflüssig; und die Kompatibilität mit primären, sich nicht teilenden und transfektionsresistenten Zelltypen erweitert die experimentellen Möglichkeiten. Eine erfolgreiche Transduktion kann durch eine dreifache Antibiotika-Selektion mit Puromycin, Hygromycin und Blasticidin bestätigt und verstärkt werden.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.