Plásmido Doble Nickase (h) LARP1: sc-404097-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)LARP1 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa LARP1 (h) y el plásmido de doble nickasa LARP1 (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a LARP1. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: LARP1 Anticuerpo (A-8): sc-515873
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) LARP1 | sc-404097-NIC | 20 µg | $410.00 |
LARP1 (proteína 1 relacionada con La) es una proteína de unión a ARN que acopla el destino del ARNm a las señales de nutrientes y crecimiento, con funciones destacadas en el control de la traducción y la estabilidad del ARNm. Interactúa con la vía mTORC1 y regula la traducción de los ARNm TOP que codifican proteínas ribosomales y factores de traducción, vinculando la biogénesis de ribosomas con la proliferación celular y las respuestas al estrés. Mediante la modulación de la traducción dependiente del cap, LARP1 contribuye a la progresión del ciclo celular y a programas adaptativos como la autofagia y la remodelación metabólica. La desregulación de la expresión de LARP1 o de su contexto de señalización se ha asociado con fenotipos proliferativos y paisajes de traducción alterados en diversos modelos de enfermedad, lo que respalda su uso como un nodo para estudiar el control del crecimiento.
LARP1 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus LARP1 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de LARP1. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de LARP1. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con LARP1 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.