Laminin γ-2 Lentiviral Activation Particles (h): sc-401068-LAC

LAMC2 kodiert die Laminin-γ2-Kette, einen zentralen Bestandteil von Laminin-332 in Basalmembranen, der die Epitheladhäsion, Polarität und Gewebeintegrität unterstützt. Über Interaktionen mit Integrinen wie α3β1 und α6β4 trägt Laminin-γ2 zur Signalgebung an Fokalkontakten, zur Organisation von Hemidesmosomen sowie zu nachgeschalteten Signalwegen einschließlich FAK/Src, PI3K–AKT und MAPK bei, die Migration und Überleben regulieren. Die proteolytische Prozessierung von Laminin-332 kann motilitätsfördernde Fragmente erzeugen und verknüpft LAMC2 damit mit der dynamischen Umgestaltung der extrazellulären Matrix während der Wundheilung. Eine dysregulierte LAMC2-Expression und eine veränderte Assemblierung von Laminin-332 werden häufig im Zusammenhang mit Defekten der epithelialen Barriere und tumorgekoppelten Invasionsprogrammen untersucht – auch als Biomarker für eine Störung der Basalmembran.

Laminin γ-2 Lentivirale Aktivierungspartikel (h) erfüllen diesen Bedarf, indem sie das vollständige Transkriptionsaktivierungssystem des Synergistic Activation Mediator (SAM) in transduktionsbereite, hoch-titrige lentivirale Partikel verpacken und so eine effiziente LAMC2-Hochregulation über ein breiteres Spektrum menschlicher Zelltypen ermöglichen.

Laminin γ-2 Lentivirale Aktivierungspartikel (h) liefern alle funktionellen Komponenten des Synergistic Activation Mediator (SAM)-Systems über lentivirale Transduktion. Das System umfasst drei Partikelpräparate, die gemeinsam in Zielzellen transduziert werden: eines, das für katalytisch inaktives dCas9 (Mutationen D10A und N863A) kodiert, das mit der VP64-Transaktivierungsdomäne und einem Blasticidin-Resistenzgen fusioniert ist; eines, das für das MS2-p65-HSF1-Fusionsprotein mit einem Hygromycin-Resistenzgen kodiert; und eines, das für eine zielspezifische 20-nt-sgRNA kodiert, die an zwei MS2-RNA-Aptamere mit einem Puromycin-Resistenzgen fusioniert ist. Nach der lentiviralen Transduktion und der genomischen Integration der Expressionskassetten werden die SAM-Komponenten stabil exprimiert und lagern sich am Zielort innerhalb der proximalen Promotorregion stromaufwärts der LAMC2-Transkriptionsstartstelle an, wo VP64, p65 und HSF1 kooperativ wirken, um endogene Transkriptionsmaschinerie zu rekrutieren und eine anhaltende Hochregulation der endogenen Laminin γ-2-Expression zu bewirken. Die Verwendung von nuklease-inaktivem dCas9 verhindert die Einführung von Doppelstrangbrüchen in der DNA und bewahrt den nativen LAMC2-Genomlokus sowie die regulatorische Architektur.

Das lentivirale Format bietet mehrere praktische Vorteile: Die stabile genomische Integration unterstützt eine vererbbare Aktivierung über Zellteilungen hinweg; Partikelpräparate mit hohem Titer machen eine eigene Virusproduktion überflüssig; und die Kompatibilität mit primären, sich nicht teilenden und transfektionsresistenten Zelltypen erweitert die experimentellen Möglichkeiten. Eine erfolgreiche Transduktion kann durch eine dreifache Antibiotika-Selektion mit Puromycin, Hygromycin und Blasticidin bestätigt und verstärkt werden.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.