Plasmide Double Nickase (h) KIR2.1: sc-401974-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) KIR2.1 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide KIR2.1 Double Nickase (h) et le plasmide KIR2.1 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant KCNJ2. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) KIR2.1 | sc-401974-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) KIR2.1 | sc-401974-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
KCNJ2 code le canal potassique humain à rectification entrante Kir2.1, un déterminant majeur du courant IK1, qui stabilise le potentiel de membrane au repos et façonne la repolarisation terminale dans les cellules excitables. La fonction de Kir2.1 est étroitement couplée à la signalisation des phosphoinositides membranaires, en particulier au contrôle de l’ouverture dépendant du PIP2, et contribue à l’excitabilité cellulaire, à la dynamique du potentiel d’action et à l’homéostasie du potassium. Une activité perturbée de KCNJ2 est associée à des phénotypes héréditaires d’arythmie et neuromusculaires, notamment le syndrome d’Andersen–Tawil, et est fréquemment étudiée dans le contexte de la conduction cardiaque, de l’excitabilité du muscle squelettique et du remodelage électrophysiologique.
KIR2.1 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus KCNJ2 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de KCNJ2. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de KCNJ2. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de KCNJ2.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.