Plasmide CRISPR/Cas9 KO KIFC1 (h): sc-405597
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- KIFC1 Le plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) est un ensemble de plasmides, chacun codant pour la nucléase Cas9 et un ARN guide (gRNA) de 20 nt spécifique à la cible, conçu pour une efficacité de knockout maximale à l'aide de séquences issues de la bibliothèque GeCKO v2
- Les séquences d'ARN guide (gRNA) dirigent Cas9 pour induire des cassures double brin (DSB) spécifiques au site dans le locus génomique KIFC1, entraînant un knock-out génique par jonction non homologue (NHEJ)
- Les gènes de résistance à la puromycine et RFP sont flanqués de sites LoxP, permettant la suppression des marqueurs de sélection via la recombinase Cre (Cre Vector : sc-418923) après l'établissement de lignées cellulaires knock-out stables
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: KIFC1 Antibody (M-63): sc-100947
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide CRISPR/Cas9 KO KIFC1 (h) | sc-405597 | 20 µg | $397.00 |
Présentation
KIFC1 code une protéine motrice de la famille des kinésines-14 à extrémité C-terminale, qui se déplace vers les extrémités moins des microtubules et contribue à l’organisation du fuseau mitotique, au regroupement des centrosomes et à une ségrégation fidèle des chromosomes. En régulant la dynamique des microtubules et l’intégrité des pôles du fuseau, KIFC1 s’interface avec le contrôle du cycle cellulaire et les réponses au stress mitotique, qui façonnent la capacité proliférative et la stabilité du génome. Une activité dérégulée de KIFC1 a été associée à des mitoses aberrantes, à l’aneuploïdie et à une survie modifiée des cellules présentant une amplification des centrosomes. Ces caractéristiques font de KIFC1 un nœud utile pour étudier les mécanismes d’assemblage du fuseau, l’instabilité chromosomique et le transport basé sur les microtubules dans les cellules humaines.
Le plasmide CRISPR/Cas9 KO KIFC1 (h) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène KIFC1 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du KIFC1, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.
La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert KIFC1 à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine KIFC1.
Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en KIFC1 pour l'étude de la signalisation de KIFC1, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.
Caractéristiques principales
- sgRNA ciblant le ou les exons de KIFC1 essentiels à la fonction de KIFC1
Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de KIFC1 pour améliorer l'efficacité du knock-out
Compatible avec l'administration par transfection
Variantes de conception
CRISPR +/- HDR
- Les gRNA codés par le KIFC1 plasmide CRISPR/Cas9 KO (h) et le KIFC1 plasmide CRISPR/Cas9 KO (h2) ciblent des sites distincts au sein du locus KIFC1. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Les constructions donneuses HDR codées par le KIFC1 plasmide HDR (h) et le KIFC1 (h2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie KIFC1 pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles KIFC1 définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.