Plasmide Double Nickase (h) KIF1A: sc-404497-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) KIF1A correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide KIF1A Double Nickase (h) et le plasmide KIF1A Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant KIF1A. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) KIF1A | sc-404497-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) KIF1A | sc-404497-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
KIF1A code une protéine motrice de la famille des kinésines-3, associée aux microtubules, qui assure un transport antérograde dépendant de l’ATP des précurseurs de vésicules synaptiques et d’autres cargos membranaires le long des axones. En couplant le trafic des cargos au cytosquelette de microtubules, KIF1A soutient la croissance des neurites, le maintien des synapses et l’homéostasie neuronale à longue distance, en s’intégrant à des voies qui régulent la dynamique des vésicules, le transport axonal et la polarité neuronale. Une altération de la fonction de KIF1A est associée à des phénotypes neurodéveloppementaux et neurodégénératifs liés à une délivrance axonale des cargos déficiente et à une dysfonction synaptique, ce qui en fait un nœud pertinent pour étudier la biologie neuronale dépendante du transport dans des systèmes cellulaires humains.
KIF1A Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus KIF1A dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de KIF1A. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de KIF1A. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de KIF1A.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.