KCNQ4 Lentiviral Activation Particles (h): sc-403090-LAC

KCNQ4 kodiert eine Untereinheit eines spannungsabhängigen Kaliumkanals, die über M‑Typ-Ströme zur Repolarisation der Membran und zur Kontrolle der zellulären Erregbarkeit beiträgt. Durch die Regulation der Kaliumleitfähigkeit beeinflusst KCNQ4 die Dynamik der Aktionspotenzialauslösung, die Ionenhomöostase sowie nachgeschaltete aktivitätsabhängige Signalprogramme in erregbaren Zellen. Eine veränderte Funktion oder Expression von KCNQ4 steht mit gestörten elektrophysiologischen Eigenschaften in Zusammenhang und wurde mit erblichen Formen des sensorineuralen Hörverlusts assoziiert, was seine Bedeutung für die Biologie des auditorischen Systems unterstreicht. Diese Eigenschaften machen KCNQ4 zu einem nützlichen Ziel für mechanistische Studien zur Regulation von Kaliumkanälen, zur erregbarkeitsabhängigen Transkription und zu Genotyp‑Phänotyp‑Zusammenhängen in krankheitsrelevanten zellulären Modellen.

KCNQ4 Lentivirale Aktivierungspartikel (h) erfüllen diesen Bedarf, indem sie das vollständige Transkriptionsaktivierungssystem des Synergistic Activation Mediator (SAM) in transduktionsbereite, hoch-titrige lentivirale Partikel verpacken und so eine effiziente KCNQ4-Hochregulation über ein breiteres Spektrum menschlicher Zelltypen ermöglichen.

KCNQ4 Lentivirale Aktivierungspartikel (h) liefern alle funktionellen Komponenten des Synergistic Activation Mediator (SAM)-Systems über lentivirale Transduktion. Das System umfasst drei Partikelpräparate, die gemeinsam in Zielzellen transduziert werden: eines, das für katalytisch inaktives dCas9 (Mutationen D10A und N863A) kodiert, das mit der VP64-Transaktivierungsdomäne und einem Blasticidin-Resistenzgen fusioniert ist; eines, das für das MS2-p65-HSF1-Fusionsprotein mit einem Hygromycin-Resistenzgen kodiert; und eines, das für eine zielspezifische 20-nt-sgRNA kodiert, die an zwei MS2-RNA-Aptamere mit einem Puromycin-Resistenzgen fusioniert ist. Nach der lentiviralen Transduktion und der genomischen Integration der Expressionskassetten werden die SAM-Komponenten stabil exprimiert und lagern sich am Zielort innerhalb der proximalen Promotorregion stromaufwärts der KCNQ4-Transkriptionsstartstelle an, wo VP64, p65 und HSF1 kooperativ wirken, um endogene Transkriptionsmaschinerie zu rekrutieren und eine anhaltende Hochregulation der endogenen KCNQ4-Expression zu bewirken. Die Verwendung von nuklease-inaktivem dCas9 verhindert die Einführung von Doppelstrangbrüchen in der DNA und bewahrt den nativen KCNQ4-Genomlokus sowie die regulatorische Architektur.

Das lentivirale Format bietet mehrere praktische Vorteile: Die stabile genomische Integration unterstützt eine vererbbare Aktivierung über Zellteilungen hinweg; Partikelpräparate mit hohem Titer machen eine eigene Virusproduktion überflüssig; und die Kompatibilität mit primären, sich nicht teilenden und transfektionsresistenten Zelltypen erweitert die experimentellen Möglichkeiten. Eine erfolgreiche Transduktion kann durch eine dreifache Antibiotika-Selektion mit Puromycin, Hygromycin und Blasticidin bestätigt und verstärkt werden.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.