JMJD3 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h2): sc-401883-KO-2
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- JMJD3 El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h2) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico JMJD3, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
JMJD3 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h2) | sc-401883-KO-2 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
KDM6B codifica la desmetilasa de histonas JMJD3, una dioxigenasa dependiente de Fe(II)/2-oxoglutarato que elimina las marcas represivas H3K27me3 para favorecer la activación transcripcional. Mediante la remodelación epigenética, JMJD3 influye en programas génicos del desarrollo, transiciones de destino celular, senescencia y transcripción inducida por estímulos aguas abajo de vías como NF-κB y TGF-β/SMAD. Su actividad modula la accesibilidad de la cromatina en potenciadores y promotores específicos de linaje, contribuyendo a la regulación de la inflamación y la diferenciación en múltiples tipos celulares. La disfunción desregulada de KDM6B/JMJD3 se ha implicado en la epigenética del cáncer, la biología de enfermedades inmunomediadas y otros contextos en los que estados aberrantes de cromatina alteran redes de expresión génica.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO JMJD3 (h2) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen KDM6B en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del KDM6B junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de KDM6B tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína JMJD3.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en KDM6B para la investigación de la señalización de JMJD3, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de KDM6B críticos para la función de JMJD3
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de KDM6B para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido JMJD3 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido JMJD3 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus KDM6B. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR JMJD3 (h) y el plásmido HDR JMJD3 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología KDM6B para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana KDM6B definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.