ISGF-3γ p48 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m): sc-421156

Übersicht

Irf9 kodiert ISGF-3γ p48 (auch als IRF9 bekannt), eine DNA-bindende Komponente des Interferon-stimulierten Genfaktor-3-(ISGF3)-Komplexes, der mit STAT1 und STAT2 zusammenwirkt, um die Transkription interferon-stimulierter Gene anzutreiben. In Mauszellen ist IRF9 zentral für die Signalübertragung von Typ-I- und Typ-III-Interferonen, indem es die JAK–STAT-Aktivierung mit antiviralen Restriktionsprogrammen, der Antigenpräsentation und einer umfassenderen Regulation der angeborenen Immunität verknüpft. Durch die Modulation von ISG-Netzwerken beeinflusst IRF9 den Entzündungsgrundtonus, die Zytokinantwort und die Kommunikation von Immunzellen in Geweben. Eine fehlregulierte IRF9/ISGF3-Aktivität wird häufig im Zusammenhang mit viraler Anfälligkeit, autoimmunitätsassoziierten Interferon-Signaturen und entzündungsgetriebener Pathologie untersucht, die für Krebs- und Stoffwechselkrankheitsmodelle relevant ist.

Das ISGF-3γ p48 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des Irf9-Gens in mouse-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des Irf9-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.

Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von Irf9 nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die ISGF-3γ p48-Proteinexpression aufheben.

Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von Irf9-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der ISGF-3γ p48-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.

Hauptmerkmale

• sgRNAs, die auf Irf9-Exone abzielen, die für die ISGF-3γ p48-Funktion entscheidend sind
  Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
  GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
  Pool von Plasmiden, die auf mehrere Irf9-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
  Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion

Designvarianten

CRISPRs +/- HDRs

• gRNAs, die vom ISGF-3γ p48 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m) und vom ISGF-3γ p48 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des Irf9-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
  HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das ISGF-3γ p48 HDR-Plasmid (m) und ISGF-3γ p48 HDR-Plasmid (m2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von Irf9-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten Irf9-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.