IRF-7 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-400450-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- IRF-7O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase IRF-7 (h) e o Plasmídeo Double Nickase IRF-7 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para IRF7. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:IRF-7 Anticorpo (F-1): sc-74471
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
IRF-7 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-400450-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
IRF-7 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-400450-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
O fator regulador de interferon 7 (IRF7) codifica a proteína IRF-7, um regulador transcricional mestre das respostas de interferon do tipo I a jusante de receptores de reconhecimento de padrões, como os receptores do tipo RIG-I e os receptores do tipo Toll (TLRs). Após a ativação pela detecção de ácidos nucleicos virais, a IRF-7 é fosforilada e transloca-se para o núcleo para induzir a expressão de IFN-α/β e de genes estimulados por interferon, moldando a imunidade antiviral inata e a sinalização inflamatória. O IRF7 integra a sinalização via TBK1/IKKε e coopera com a NF-κB para coordenar redes de citocinas que influenciam a ativação de células imunitárias e a apresentação de antigénios. A desregulação da atividade de IRF7 tem sido associada a alterações na defesa antiviral e a assinaturas de interferon aberrantes observadas em várias doenças imunomediadas e patologias associadas à inflamação, tornando-o um alvo frequente em estudos mecanísticos do controlo da via do interferon.
IRF-7 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus IRF7 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de IRF7. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função IRF7. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com IRF7 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.