Plasmide Double Nickase (h) IRF-2: sc-402135-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) IRF-2 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide IRF-2 Double Nickase (h) et le plasmide IRF-2 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant IRF2. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: IRF-2 Antibody (G-10): sc-374327
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) IRF-2 | sc-402135-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) IRF-2 | sc-402135-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Le gène humain **IRF2** code le facteur régulateur de l’interféron 2 (**IRF-2**), un facteur de transcription se liant à l’ADN qui module les programmes géniques stimulés par l’interféron ainsi que, plus largement, la transcription induite par les cytokines. IRF-2 se fixe sur les éléments de réponse aux gènes stimulés par l’interféron afin de façonner la signalisation de l’immunité innée, influençant des processus tels que la défense antivirale, l’homéostasie inflammatoire et le contrôle transcriptionnel lié au cycle cellulaire. Par son interaction croisée avec les voies de l’interféron dépendantes de JAK/STAT et d’autres régulateurs transcriptionnels, IRF-2 peut ajuster l’amplitude et la durée de l’expression des gènes de l’immunité. Une activité d’IRF2 dérégulée a été associée, dans des systèmes expérimentaux, à des phénotypes de signalisation immunitaire altérés pertinents pour la biologie des infections, l’auto-immunité et les mécanismes d’échappement immunitaire associés aux tumeurs.
IRF-2 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus IRF2 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de IRF2. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de IRF2. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de IRF2.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.