Plasmide Double Nickase (h) IRAK-2: sc-404304-NIC

Le gène humain **IRAK2** code l’interleukin-1 receptor–associated kinase 2 (IRAK-2), un membre de la famille des kinases sérine/thréonine qui agit comme intermédiaire central de signalisation en aval des récepteurs Toll-like et du récepteur de l’IL-1. IRAK-2 participe à des complexes de signalisation dépendants de MyD88, contribuant à l’activation des voies NF-κB et MAPK et modulant des programmes transcriptionnels qui régulent les cytokines inflammatoires et les réponses immunitaires innées. Par son rôle dans la signalisation des récepteurs à domaine TIR, IRAK-2 influence l’activation des cellules immunitaires, la signalisation de réponse aux pathogènes et les interactions avec les voies liées au stress et à l’apoptose. Une dérégulation de la signalisation associée à IRAK2 a été reliée à des états inflammatoires aberrants et à une signalisation immunitaire altérée observés dans de multiples contextes pathologiques, ce qui étaye son utilisation comme cible mécanistique dans des études centrées sur les voies de signalisation.

IRAK-2 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus IRAK2 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de IRAK2. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de IRAK2. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.

Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de IRAK2.

Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.