Plásmido Doble Nickase (m) Integrin α3/ITGA3/CD49c: sc-421161-NIC
- Especies Diana: mouse
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (m)Integrin α3/ITGA3/CD49c consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa Integrin α3/ITGA3/CD49c (m) y el plásmido de doble nickasa Integrin α3/ITGA3/CD49c (m2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a Itga3. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: Integrin α3/ITGA3/CD49c Anticuerpo (A-3): sc-374242
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (m) Integrin α3/ITGA3/CD49c | sc-421161-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (m2) Integrin α3/ITGA3/CD49c | sc-421161-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Itga3 codifica la integrina α3 (CD49c), que forma un heterodímero con la integrina β1 para constituir un receptor de unión a laminina que media la adhesión célula–matriz extracelular y la organización de la membrana basal. La señalización dependiente de ITGA3 regula la dinámica de las adhesiones focales, la remodelación del citoesqueleto y la polaridad de las células epiteliales a través de vías que incluyen FAK/Src, PI3K–AKT y MAPK, influyendo en la migración, la proliferación y la supervivencia. En tejidos de ratón, la integrina α3 contribuye a la integridad epitelial en órganos como la piel, el pulmón y el riñón, y su desregulación se estudia con frecuencia en contextos de adhesión alterada, inflamación y fenotipos invasivos relevantes para la biología del cáncer y la remodelación tisular.
Integrin α3/ITGA3/CD49c El plásmido de doble nicasa (m) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus Itga3 en líneas celulares mouse. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de Itga3. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de Itga3. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con Itga3 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.